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单分子荧光染料——ATTO荧光染料
2019.08.03   点击87次

单分子荧光检测技术是近十年来迅速发展起来的一种超灵敏的检测技术,其检测尺度可以精确到纳米量级,是单分子检测的首选方法。该检测技术利用荧光标记来显示和追踪单个分子的构象变化、动力学、单分子之间的相互作用以及进行单分子操纵。而荧光染料作为重要的标记物在单分子检测中起到了举足轻重的作用。

荧光染料,指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。其作为标记物,广泛应用于荧光免疫、荧光探针、细胞染色等多个方面。包括特异性的DNA染色,用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究。

ATTO是最为常见的荧光染料之一,其可作为一系列生物分子如蛋白质和核酸的荧光标记和分子探针,其波谱涵盖了从紫外光到近红外光范围,是最全波段的荧光标记。 与其他染料相比,其在红色光谱区中拥有优良的光稳定性和亮度。

荧光染料参数小知识:

1、初始亮度

是指示荧光染料的相对亮度,该值由摩尔消光系数和量子产率得出,这两个参数对于每一单个荧光染料来说都是特异性的。具有较高初始亮度的荧光染料适用于检测较低丰度的靶标。

2、缓冲液中的光稳定性

是初始荧光强度在经过30秒连续照明后残留比率的相对百分比。缓冲体系中光稳定性较高的染料将更适合于活细胞成像和检测等相关应用。

3、抗淬灭剂中的光稳定性

是初始荧光强度在经历30秒连续照明后残留强度的相对百分比。抗淬灭试剂中光稳定性较高的染料更适合于固定细胞样本的成像和检测实验。

4、染色指数

是一个归一化数值,可用于比较不同荧光染料在流式细胞术应用中荧光亮度的差异;该值通过使用阳性区域的平均荧光强度(MFI)减去阴性区域的平均荧光强度得到的差值,再除以两倍的阴性区域标准差获得。

5、激光束

表示流式细胞检测中常用的激光束。

6、通用检测通道

表示能够生成最佳成像结果的标准显微镜滤光片设置。

7、最大激发波长

表示获得峰值的激发波长。

8、最大发射波长

表示获得峰值的发射波长。


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